光电工程师社区

标题: 化学发光免疫分析 [打印本页]

作者: bobyoung 时间: 2005-4-26 18:25
标题: 化学发光免疫分析
化学发光免疫分析（Chemiluminescence Immunoassay，CLIA）是近十年来在世界范围内发展非常迅速的非放射性免疫分析，是继酶免技术（ＥＩＡ）、放免技术（RＩＡ）、荧光免疫技术（FＩＡ）之后发展起来的一种超高灵敏度的微量测定技术。具有高灵敏度、检测范围宽、操作简便快速、标记物稳定性好、无污染、仪器简单经济等优点。它是放射性免疫分析与普通酶免疫分析的取代者，是目前免疫定量分析最理想的方法。该技术利用化学反应释放的自由能激发中间体，使其从激发态回到基态，释放出等能级的光子，经化学发光免疫分析仪对光子的测定，精确定量被测物含量。CLIA发展迅猛，已占各种免疫分析的首位。CLIA分三种类型：类型原理及试剂发光类型化学发光免疫分析（CLIA）用化学发光物质直接标记抗原或抗体组成吖啶酯（acrydinum esters）闪光型化学发光酶免疫分析（CLEIA）不用化学发光物直接标记免疫制剂。在酶免疫分析完成后加入化学发光底物，产生化学发光 1. 辣根过氧化物酶(HRP)/H2O2/Luminol系统辉光型 1. 2. 碱性磷酸酶(AP)/1，2二氧乙烷稳定衍生物（AMPPD）系统辉光型电化学发光免疫分析（ECLIA）应用电致化学发光标记物与电化学手段相结合产生化学发光的免疫分析三联吡啶钌（Rucbpy）32+ 三丙胺氨系统 80年代kodak公司推出半自动化Aerlite-MABtm发光免疫定量分析仪，把软件系统应用于发光免疫反应分析中。由于CLIA有着无比广阔的应用前景，各国实验医学专家与电子工程师联合起来致力于研制新一代超微分析仪。新型的的化学发光全自动免疫分析仪不断推陈出新，形成以拜耳（康仁）、雅培、贝克曼、德普等为代表的各个公司产品竞争市场，相互媲美的局面。如ACCESS全自动微粒子化学发光免疫分析仪、ACS-180Se等，这些仪器集合了先进的计算机控制全自动分析技术、稳定的增强化学发光技术、微粒子免疫固相分析技术以及独特高效的超声波抗污染技术、多探针分析技术，具有随机、连续、紧急取样、快速准确出报告的性能，可进行甲状腺、生殖、代谢、心血管、肿瘤、病毒性肝炎、贫血、药物浓度监测等多类系统100余种项目的检测，在世界范围内广泛应用于临床诊断和科学研究，同时亦可应用于环保监测、刑事侦察、海关检查、动植物检验检等众多领域。我国陕西师大章竹君、福州大学张帆在20世纪最后20年，对化学发光仪器与试剂研制取得突破，现有国产化学发光仪器品种10多种，其中获注册证的仅2个：石家庄华洋分析仪器有限公司的CLIA-IIM型酶促化学发光免疫分析仪<冀药管械（试）2003第2050015号>、哈尔滨思创生物技术有限公司的光子记数分析仪<黑药管械（准）子2003第2400002号>。化学发光的发光类型通常分为闪光型（flash type）和辉光型（glow type）两种。闪光型发光时间很短，只有零点几秒到几秒。辉光型又称持续型，发光时间从几分钟到几十分钟，或几小时至更久。闪光型的样品必须立即测量，必须配以全自动化的加样及测量仪。测量辉光型的样品可以使用通用型仪器，也可以配有全自动化仪器。目前已有的各种免疫分析尚没有出其右者，现在国外发达国家在CLIA的研究和开发方面进展很快，已有全自动的化学发光（闪光型和辉光型）与电化学发光免疫分析等系列产品。目前临床免疫检测所用技术主要有两类：放射免疫分析（RIA）和酶联免疫分析（EIA）。RIA的优点：敏感度高，准确度和重复性好，可作超微量定量分析。缺点是：只能在大型医院应用，难以普及至基层医疗机构；放射同位素r-射线对人体造成辐射损伤；检测废弃物对环境造成放射污染；保质期短，仅一个月。EIA操作简便，易普及。但敏感度差，重复性和准确性不好，主要用于定性分析，难以作定量分析；酶标技术的底物大部分有毒或为致癌物，不能储存，使用时要新鲜调配；酶标本身也不稳定，易受温度和酸碱度变化的影响。因此，目前临床免疫检测存在的问题是：敏感度高、准确性和重复性好的RIA不能普及，而易普及、操作简便的EIA达不到临床要求。近来快速发展的化学发光免疫分析（CLIA）是无放射性的超微量免疫分析新技术。它的敏感度超过RIA： 10-15(CLIA) > 10-12 (RIA) > 10-9 (EIA) CLIA的准确度和重复性可与RIA媲美，普及性好，可在各级医疗机构应用。CLIA继承了RIA所有的优点，同时克服了二者共同的缺点，具有灵敏度高，特异性强，精密度好，线性范围宽，仪器设备简单，试剂价格低廉，方法稳定、快速等优点，正成为一种重要的非同位素标记免疫分析方法，用于各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药物等的检测。所以CLIA是临床免疫检测最理想的新方法。专家预言，在不久的将来CLIA可以取代RIA和EIA成为临床免疫检测最理想的新技术。目前已有若干国际知名公司（罗氏、拜耳、德普等）及配套仪器进入我国，但试剂与仪器的价格都很贵，不适应在我国广泛的普及和应用。目前我国的CLIA产品基本尚属空白。因此，我国亟待研究开发符合国内条件及需求并在国内有竞争力的CLIA系列产品，使我国的免疫分析能尽快赶上当今世界范围内免疫分析发展的趋势和步伐。

作者: qz20032000 时间: 2005-4-27 22:01
能告知闪光型和辉光型两种不同试剂的优劣或差异吗？

作者: bobyoung 时间: 2005-4-30 00:22
两者的区别是发光型式不一样。闪光型试剂的发光时间很短，会很快衰减；而辉光型的试剂发光过程有一个比较稳定的平台，在这段时间内发光比较均匀，衰减很小。因此针对这两个类型的试剂，检测仪器有很大的差别。前者必须是全自动的，仪器与试剂是配套的，或称是封闭的；后者可以用半自动的仪器实现检测。总体来看，闪光型的应该更准确，但实现难度比较大，国内目前还没有公司生产；辉光型的相对而言，试剂与仪器的开发都要简单些，国内目前已有几家公司的产品。

作者: bobyoung 时间: 2005-4-30 00:34
另外，用闪光型的试剂可能检测成本也会高一些

作者: bobyoung 时间: 2005-4-30 00:35
化学发光应该是免疫测定领域的一个发展趋势和方向。

作者: qz20032000 时间: 2005-4-30 17:51
谢谢高手！那闪光型比辉光型试剂在检测灵敏度和检测极限有优势吗？"更准确"体现在那个指标上？

作者: bobyoung 时间: 2005-5-10 16:28
不好意思，五一期间回家了，近来有点忙，没能及时回答你的问题，十分抱歉。
两者间的比较，我在文献上没有看到。本人接触的多属于辉光型的。因为这主要的试剂方面的问题，目前本人还不甚清楚。

作者: jiahao 时间: 2008-8-5 13:54
要硅光电池的可以找我，德国韩国进口，质量不错

欢迎光临光电工程师社区 (http://bbs.oecr.com/)